James blev gift med Margaret Douglas i 1532. Margaret (datter af Archibald Earl of Angus Douglas, 6th og Princess Of England Queen Of Scotland Margaret Plantagenet Tudor) blev født den 8 okt. 1515 i Harbottle Castle, Northumberland, England; døde den 9 mar. 1578 i Hackney, London, Middlesex, England. [Gruppeskema] [Familietavle]

1. Claud Hamilton blev født i sep. 1543 i Hamilton, Lanarkshire, , Scotland; døde i 1621 i Paisley, , Renfrew, Scotland.
2. John Hamilton blev født i 1535 i Arron, Butshire, Scotland; døde den 6 apr. 1604 i England.